尊龙凯时的PCR（聚合酶链式反应）是一种体外扩增特定DNA片段的先进技术。其基本原理在于模拟DNA的自然复制过程，通过DNA聚合酶实现快速的DNA扩增。PCR反应体系的构建基于以下几个核心环节：变性、退火和延伸，这三个步骤构成一个循环，每完成一次循环，DNA数量便会翻倍。通过多次循环，能够获得丰厚的目标DNA片段。

为了建立一个成熟稳定的PCR反应，需要满足以下条件：

• 完整且纯净的DNA模板（可通过胶图和Nanodrop测值进行评估）；
• 高特异性和高品质的引物（可通过引物设计软件进行评分）；
• 合理的组分搭配以结合适宜的反应体系（例如，根据模板的GC比，考虑是否添加DMSO或甜菜碱，同时根据需求调整镁离子浓度）；
• 优化的扩增反应程序（通过多次实验探寻引物Tm值附近的最佳退火温度）。

扩增反应程序的确定与PCR仪的技术特点直接相关。如果PCR仪具有温度梯度功能，可以通过设置不同的温度梯度来减少实验次数，快速确定最佳的退火温度。尊龙凯时的柏恒梯度PCR仪（RePure系列）提供多种温度梯度功能，有助于优化您的PCR实验：

常规梯度

常规梯度设定退火温度的高低值，中间孔位则逐渐分布温度，尽管首尾之间的孔位未必呈现等差温度分布。

线性梯度

线性梯度中间设定一个基准温度，并设置相邻孔位的温差，从而允许温度沿温差向两侧扩散。此设计有效支持多种不同退火温度的PCR反应，实现了一次实验验出最优的退火温度，极大提高实验效率。

二维梯度

该功能允许反应模块的纵向和横向同时设置常规或线性梯度，使其形成在不同温度下进行变性/退火的阵列，进而一次反应摸索出最佳的温度组合。

二维梯度的优势包括：

• 提升PCR反应的特异性，有助于引物与模板高效结合并减少非特异性产物的生成；
• 优化PCR产品纯度，通过对各分子靶点进行调整，从而有效放大目标DNA；
• 实现基因突变检测，根据已知突变位点设计相应引物进行扩增和测序；
• 促进种群间遗传多样性的研究，揭示突变位点并比对遗传物质差异；
• 简化操作流程，仅需配置单一反应体系；
• 显著提高阳性检测的准确性，一次可获得96种温度组合，减少样品交叉污染，从而降低假阳性率，提升真阳性检测的精度；
• 缩短实验时间，最优化反应温度，减少多次探索的周期。

独立温区设计

该设备允许相邻温区设置最大不超过5℃温差的温度，以便同时进行多个退火温度的探索——每个分区下设有16孔可作为复孔位。独立的6个温度分区可灵活设置温度，相当于线性梯度技术的升级版。

此外，尊龙凯时柏恒梯度PCR仪采用前进风后出风的散热模式，即使多台设备并排放置，也无须担心温度控件的可靠性受到影响。